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Riboflavin wurde 1932 aus Hefe isoliert und bald darauf wurde auch die Struktur aufgeklärt. In der Nahrung kommt sowohl freies Riboflavin als auch proteingebundenes Flavinmononucleotid (FMN) und Flavinadenodinucleotid (FAD) vor, die alle als Vitamin B2 bezeichnet werden.